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凱氏定氮儀的使用注意3方面

更新時(shí)間:2017-09-30  |  點(diǎn)擊率:2605
    凱氏定氮儀的使用注意3方面
  凱氏定氮儀是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無(wú)機(jī)銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來(lái)并為過(guò)量的硼酸液吸收,再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定,就可計(jì)算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。因其蛋白質(zhì)含量測(cè)量計(jì)算的方法叫做凱氏定氮法,故被稱為凱氏定氮儀又名定氮儀、蛋白質(zhì)測(cè)定儀、粗蛋白測(cè)定儀。
  凱氏定氮儀使用需注意哪些方面?
  1、凱氏定氮儀稀釋水采用中性去離子水;蒸汽發(fā)生瓶?jī)?nèi)的水必須保持酸性;硼酸吸收液配制時(shí)應(yīng)用中性去離子水,避免堿性物質(zhì)的混入,盛裝硼酸吸收液的容器應(yīng)刷洗干凈;堿液應(yīng)用中性去離子水配置;滴定用的標(biāo)準(zhǔn)酸必須按照標(biāo)準(zhǔn)配制和標(biāo)定。上機(jī)測(cè)試樣品前,應(yīng)打開(kāi)凱氏定氮儀預(yù)熱,放一支消化管空蒸一次,排除蒸餾管路中的空氣。蒸餾時(shí)必須加堿,加入堿的作用一是中和硫酸,二是使溶液處于強(qiáng)堿性,這樣才能使(NH4)2SO4變成NH3被硼酸吸收,通常是消化取用濃硫酸的四倍體積(40%NaOH)。硫酸銅可作為催化劑,并在蒸餾時(shí)作堿性反應(yīng)指示劑,氫氧化鈉是否足量.可借助硫酸銅在堿性條件下生成的褐色沉淀或深藍(lán)色的銅氨絡(luò)離子指示。若溶液的顏色不改變,則說(shuō)明所加的堿液不足。蒸餾是否*,凱氏定氮儀可用精密pH試紙測(cè)冷凝管的冷凝液來(lái)確定,中性說(shuō)明已蒸餾*。凱氏定氮儀目前主要是以蒸餾體積與設(shè)置時(shí)間(經(jīng)驗(yàn)值)確保蒸餾*。蒸餾結(jié)束后,滴定主要是是分為人工滴定和機(jī)器自動(dòng)滴定計(jì)算和打印實(shí)驗(yàn)結(jié)果。要求操作者根據(jù)實(shí)際情況,按照要求操作。
  2、樣品前處理:樣品應(yīng)盡量選取具有代表性的,大塊的固體樣品應(yīng)用粉碎設(shè)備打得細(xì)小均勻,液體樣要混合均勻。
  3、模塊化消解裝置消化樣品:消化過(guò)程中,首先確保濃硫酸量足夠,如樣品脂肪含量較高時(shí),應(yīng)適當(dāng)增加硫酸量;其次對(duì)某些樣品炭化易產(chǎn)生泡沫,這時(shí)可采用消解爐曲線升溫或手動(dòng)控制升溫,讓消解溶液沸騰均勻后再提高消解溫度,直至消化液呈透明藍(lán)綠色再消化0.5h或1h。因?yàn)樘炕^(guò)程中,升溫速度過(guò)快會(huì)使樣品溢出消化管或?yàn)R起粘附在管壁導(dǎo)致無(wú)法消化*而造成氮損失,影響凱氏定氮儀結(jié)果準(zhǔn)確性。