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上海沛歐定氮儀和消化爐檢測(cè)辣木葉提取物中的蛋白質(zhì)含量

更新時(shí)間:2021-01-06  |  點(diǎn)擊率:2511

摘要:采用凱氏法測(cè)辣木葉提取物中的蛋白質(zhì)含量是國標(biāo)推薦方法。

 

 

關(guān)鍵詞:沛歐全自動(dòng)定氮儀、消化爐、辣木葉蛋白質(zhì)含量

 

引言:辣木葉為辣木科辣木屬植物的樹葉,可食用,營養(yǎng)價(jià)值非常豐富,含有大量的蛋白質(zhì)、氨基酸、纖維素及礦物質(zhì),具有降血糖、降脂、降壓、抗腫瘤、抗氧化、通便、改善睡眠等功效,長期食用可增強(qiáng)人體**功能,延緩衰老、預(yù)防**,其蛋白質(zhì)的含量直接影響辣木葉的品質(zhì)和營養(yǎng)功效,因此對(duì)辣木葉提取物蛋白質(zhì)含量的測(cè)定具有重要的意義。為此我們使用沛歐全自動(dòng)定氮儀SKD-1000(采用通用的顏色法判斷、具有多項(xiàng)磚利技術(shù))紅外石英消化爐SKD-20S2對(duì)辣木葉提取物進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測(cè)。

 

前言:GB2009.5食品安國內(nèi)家標(biāo)準(zhǔn) 《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》**法要求測(cè)試。

 

參考文獻(xiàn):GB2009.5

 

 

一、原理

辣木葉提取物樣品在濃硫酸和硫酸銅、硫酸鉀高溫下,把有機(jī)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞,把氮元素氧化成硫酸銨,(為了使得樣品消化時(shí)不產(chǎn)生掛壁,必須采用樣品孔間溫差小和帶程序升溫功能的消化爐,否則會(huì)產(chǎn)生掛壁現(xiàn)象,導(dǎo)致消化失?。┫瓿珊?,需要將樣品冷卻到40℃左右,再把消化管放入定氮儀上。消化管內(nèi)自動(dòng)添加稀釋液、堿,反應(yīng)杯內(nèi)自動(dòng)添加硼酸和顯色劑。對(duì)消化管內(nèi)樣品加熱逸出氨氣和水蒸氣混合液,冷卻流到反應(yīng)杯內(nèi),同時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸進(jìn)行滴定,直到蒸餾結(jié)束和滴定到終點(diǎn)。計(jì)量消耗標(biāo)準(zhǔn)鹽酸的體積即可計(jì)算辣木葉提取物中蛋白質(zhì)含量。

二、儀器和設(shè)備

1. 全自動(dòng)定氮儀SKD-1000(上海沛歐分析儀器有限公司)

2. 消化爐SKD-20S2(上海沛歐分析儀器有限公司)

3. 萬分之**平

4. 滴管移液器

5.烘箱

三、試劑、樣品和標(biāo)準(zhǔn)品

1. 標(biāo)準(zhǔn)鹽酸濃度:0.1114 mol/L

2. 40%的氫氧化鈉

3.2%的硼酸+甲基紅和嗅甲酚綠混合的顯色劑(1:3.5

4.催化劑(硫酸銅:硫酸鉀為1:10的混合物)

5.蒸餾水

6.樣品:辣木葉提取物20201001

7.硫酸銨 

四、操作條件和程序

1. 樣品制備

用分析天平依次稱取2個(gè)空白,稱樣量為:①0.4082 g硫酸銅、3.6037 g硫酸鉀;②0.4045 g硫酸銅、3.6049 g硫酸鉀,5個(gè)辣木葉提取物待測(cè)樣品,稱樣量為:①0.4061 g硫酸銅、3.6010 g硫酸鉀、0.4058 g辣木葉提取物;②0.4048 g硫酸銅、3.6035 g硫酸鉀、0.4037 g辣木葉提取物;③0.4097 g硫酸銅、3.6060 g硫酸鉀、0.4032 g辣木葉提取物;④0.4069 g硫酸銅、3.6018 g硫酸鉀、0.4096 g辣木葉提取物;⑤0.4047 g硫酸銅、3.6009 g硫酸鉀、0.4011 g辣木葉提取物,將稱量好的空白與樣品分別置于標(biāo)號(hào)的消化管中,依次向每個(gè)消化管中加入10 mL硫酸。

2. 樣品消化及消化爐參數(shù)設(shè)置

將制備好的空白及樣品按序號(hào)放入消化爐,蓋上排廢氣裝置,打開抽氣泵上水開關(guān)(前三個(gè)階段水流要大,使釋放出大量廢氣能及時(shí)排除,第四階段水流開小以避免酸霧排出),然后進(jìn)行消化爐溫度-時(shí)間曲線參數(shù)設(shè)置:135度(20分鐘)--190度(25分鐘)---350度(5分鐘)----400度(70分鐘),消化爐根據(jù)時(shí)間-溫度曲線自動(dòng)升溫和保溫,直到消化結(jié)束。把消化架取下放在冷卻架上,冷卻到40℃左右。

3.凱氏定氮儀儀器回收率測(cè)定

用分析天平精密稱量已烘干的硫酸銨(125 ℃烘箱烘2h2份,稱樣量為:0.1041 g、0.115 g,分別置于標(biāo)號(hào)的消化管中,然后在凱氏定氮儀儀器上進(jìn)行測(cè)定參數(shù)設(shè)置進(jìn)行測(cè)定,參數(shù)設(shè)置為:堿10 mL、稀釋液20 mL、樣品0.1041g0.115g、滴定酸為鹽酸、標(biāo)準(zhǔn)酸濃度為0.1114 mol/L、定時(shí)6 min、系數(shù)1、名稱硫酸銨1和硫酸銨2,參數(shù)設(shè)置完畢后,點(diǎn)擊屏幕上的測(cè)試程序中的調(diào)取,*后點(diǎn)擊樣品測(cè)試選項(xiàng)即可進(jìn)行測(cè)試,測(cè)試完畢后查看兩次平行測(cè)定的含氮和消耗酸的數(shù)據(jù)是否正常,依次來判定該儀器運(yùn)行是否正常。

4.凱氏定氮儀參數(shù)設(shè)置

  打開凱氏定氮儀顯示屏,點(diǎn)擊參數(shù)設(shè)置,依次輸入堿45 mL、稀釋液40mL、樣品克數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)酸濃度0.11414 mol/L、定時(shí)6 min、樣品名稱、系數(shù)6.25,總共測(cè)5個(gè)樣品,因此要依次設(shè)置5次,一并保存,即可自動(dòng)測(cè)定。

5.樣品蛋白質(zhì)測(cè)定

  參數(shù)設(shè)置完后,便可將對(duì)應(yīng)標(biāo)號(hào)的空白和樣品的消化管接到儀器對(duì)應(yīng)位置,先測(cè)空白,再依次測(cè)樣,測(cè)定數(shù)據(jù)依次自動(dòng)保存在儀器硬件盤中,測(cè)完查詢記錄即可。

6.計(jì)算公式

蛋白質(zhì)含量計(jì)算公式x%=6.38×1.401(v-v0)c/m

氮含量計(jì)算公式y%=1.401(v-v0)c/m

x%---------蛋白質(zhì)含量

y%---------氮含量

v--------消耗標(biāo)準(zhǔn)酸體積(ml)

V0------空白消化標(biāo)準(zhǔn)酸體積(ml)

C--------標(biāo)準(zhǔn)酸濃度(mol/L)

m--------樣品質(zhì)量()

質(zhì)控品采用烘干的分析純(99%)硫酸氨,硫酸銨理論含氮量21.21%

 

辣木葉1

 

辣木葉2

 

 

辣木葉3

 

 

辣木葉4

 

 

辣木葉

5

 

 

硫酸氨

1

 

 

硫酸氨

2

 

消耗標(biāo)準(zhǔn)酸(ml)

3.795

3.77

3.656

3.696

3.620

14.174

15.109

蛋白質(zhì)含量(%)

9.1225

9.1262

8.8450

8.8018

8.8037

-----------

-----------

含氮量(%)

-------------

------------

--------------

--------------

--------------

21.2503

21.1487

空白消耗標(biāo)準(zhǔn)酸體積(ul)

551

551

551

551

551

247

247

 

結(jié)果分析:本次測(cè)試數(shù)據(jù)符合要求,數(shù)據(jù)可靠。

 

附:5009.5-2010 《食品安國內(nèi)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》

 

注意事項(xiàng):

辣木葉提取物在取樣時(shí)注意均勻性,在消化樣品時(shí),尤其是含糖、油脂的樣品容易起泡產(chǎn)生樣品掛壁,這時(shí)消化爐要有程序升溫功能,孔間溫差要小,避免樣品溫差所產(chǎn)生的升溫不協(xié)調(diào)而使樣品掛壁。

定氮儀要有足夠大的蒸餾功率,以便盡可能蒸餾出氨氣,提升回收率。如果全自動(dòng)定氮儀則采用顏色法終點(diǎn)判斷的方法,保障數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和儀器的線性度。

 

儀器安裝現(xiàn)場圖

 

 

 

 

 

 

 

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